细胞生物学实验技术(第二版)

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商品介绍

内容推荐

  为了跟上学科的发展,适应发展的需要,作者对《细胞生物学实验技术》进行修订更新,推出第二版,新版适合大多数院校(普通高等学校及医药院校)研究生与本科生学习细胞生物学技术的需要。特点在于:

  基础训练为主,同时增加最新而又不难掌握与了解的技术。本版中除了保留原有大部分内容之外,根据反馈意见增加了作为生物学与医学研究最基本手段的组织学切片技术,也不失时宜地补充了多种干细胞培养的培养方法、鉴定及运用,其中包括诱导多潜能干细胞(iPScells)和肿瘤干细胞培养、细胞自噬、端粒与端粒酶显示技术、酵母双杂交技术、昆虫杆状病毒表达系统等。

  本版也尝试采用如同《精编细胞生物学实验指南》(ShodProtocols in CellBiology,edJSBonifacino,etal,byJohnWiley&Sonslnc.)那样将所介绍的方法分为基本方案、备择方案和支持方案3类。基本方案是指总体推荐或是最普遍应用的方法,也是使用者应力求掌握的方法。备择方案乃针对采用不同设备和试剂而达到相同结果时可选用者,或许可以认为它是基本方案的一种补充与佐证。支持方案所描述的是进行基本方案或备择方案所需要的那些附加步骤,这些步骤独立于核心方案,它们或许也可以在其他实验中用到。

  本书可以作为相关高等院校的本科教材,也可供从事细胞生物学研究工作的人员阅读参考。

  读者对象:本书可以作为相关高等院校的本科教材,也可供从事细胞生物学研究工作的人员阅读参考。

 

目录

  第一章 显微镜技术

   基本方案1 普通显微镜的构造及使用方法

   基本方案2 相差显微镜的构造及使用方法

   基本方案3 荧光显微镜的构造及使用方法

   基本方案4 透射电子显微镜与超薄切片技术

   基本方案5 扫描电子显微镜与样品制备

   备择方案1 激光扫描共聚焦显微镜的构造及使用方法

   备择方案2 激光捕获显微切割技术

   支持方案显微摄影技术

  第二章 组织学基本技术

   基本方案1 石蜡切片技术

   基本方案2 冰冻切片技术

   基本方案3 苏木素?伊红(hematoxylin?eosinstain,HE)染色技术

   备择方案1 吉姆萨(Giemsa)染色技术

   备择方案2 组织学切片的Feulgen染色技术

   备择方案3 中性脂肪油红O显示(Oil red O stain)技术

   备择方案4 组织切片的碱性磷酸酶染色技术(ALP钙?钴法)

   备择方案5 组织切片的琥珀酸脱氢酶染色(SDH stain)技术

   备择方案6 组织切片的核酸甲苯胺蓝显示技术

  第三章 细胞结构与成分的显示技术

   基本方案1 细胞中DNA和RNA的显示

   基本方案2 细胞中过氧化物酶的显示

   基本方案3 细胞中碱性蛋白的显示

   基本方案4 一氧化氮合酶的显示

   基本方案5 细胞中线粒体的活体染色

   基本方案6 细胞中糖类和脂类的显示

   基本方案7 酸性磷酸酶的显示

   备择方案1 细胞中液泡系的活体染色

   备择方案2 培养细胞完整生物膜系统的观察

   备择方案3 微丝的染色及形态观察 支持方案间接免疫荧光技术显示胞质微管

  第四章 细胞生理实验

   基本方案1 细胞的运动

   基本方案2 细胞的吞噬活动

   基本方案3 细胞自噬检测方法

   备择方案细胞膜通透性的测定

  第五章 细胞培养和分析

   基本方案1 细胞的原代培养

   基本方案2 培养细胞的形态观察和计数

   基本方案3 培养细胞生长曲线的绘制和分裂指数的测定

   基本方案4 细胞集落形成实验

   基本方案5 器官培养方法

   基本方案6 鸡胚尿囊培养法

   备择方案1 细胞的传代培养

   备择方案2 MTT对细胞生长状况的检测

   备择方案3 表皮细胞的培养

   备择方案4 骨骼肌细胞的培养

   备择方案5 内皮细胞的培养

   备择方案6 神经胶质细胞的培养

   备择方案7 骨髓间充质干细胞的培养及其体外诱导分化

   支持方案1 细胞的冻存与复苏

   支持方案2 细胞显微测量技术

   支持方案3 细胞培养中支原体污染的检测

   支持方案4 放射自显影术及同位素液闪测定

  第六章 干细胞培养及诱导分化

   基本方案1 人胚胎干细胞传代培养

   基本方案2 人胚胎干细胞的诱导分化

   基本方案3 肿瘤干细胞的分离纯化

   备择方案诱导多潜能干细胞

   支持方案小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)

   的分离及饲养层的制备

  第七章 细胞周期分析

   基本方案流式细胞仪检测细胞周期

   备择方案1 细胞同步化实验

   备择方案2 通过分析CDK的活性检测细胞周期

  第八章 细胞成分的分离与分析

   基本方案1 差速离心法分离细胞和细胞器

   基本方案2 密度梯度离心法分离细胞组分

   基本方案3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质

   基本方案4 Western印迹技术

   备择方案免疫沉淀法

   支持方案蛋白质的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳

  第九章 细胞工程基础技术

   基本方案1 细胞融合实验

   基本方案2 单克隆抗体的制备

   备择方案1 染色体提前凝集标本的制备

   备择方案2 显微注射技术(核移植)

   备择方案3 DNA转染实验(绿色荧光蛋白)

   支持方案体外受精技术

  第十章 细胞凋亡的测定

   基本方案1 凋亡细胞的普通光镜观察

   基本方案2 凋亡细胞的荧光显微镜观察

   基本方案3 凋亡细胞的琼脂糖凝胶电泳检测——DNA梯状条带(DNA ladder)

   备择方案1 凋亡细胞的电镜观察

   备择方案2 凋亡细胞的原位末端标记法检测

   备择方案3 凋亡细胞的单细胞电泳检测

   备择方案4 凋亡细胞的流式细胞法检测

   支持方案磷酸酰丝氨酸外化的流式细胞术分析

  第十一章 染色体技术

   基本方案1 染色体标本制备

   基本方案2 端粒及端粒酶显示技术

   备择方案1 染色体显带技术

   备择方案2 性染色质的制备

   备择方案3 姐妹染色单体交换实验

   备择方案4 染色体原位杂交技术

   支持方案染色体实验试剂配制

  第十二章 分子细胞生物学技术

   基本方案1 DNA提取及检测

   基本方案2 RNA提取及检测

   基本方案3 Southern印迹技术

   基本方案4 Northern印迹技术

   基本方案5 RNA干扰技术

   基本方案6 酵母双杂交技术

   备择方案1 RT?PCR

   备择方案2 原位PCR技术

   备择方案3 荧光定量PCR技术

   备择方案4 基因芯片技术

   备择方案5 原位缺口平移技术

   备择方案6 染色质免疫沉淀法

   备择方案7 昆虫杆状病毒表达系统

   备择方案8 GST pull?down分析

  参考文献

    

前言

  自《细胞生物学实验技术》(第一版)问世以来,已5年过去了。我们见证了细胞生物学领域又有诸多的重要进展,譬如端粒与端粒酶的研究、诱导多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS cells)的研究、组学革命(omics revalution)、细胞自噬的深入研究等。正如前一版前言中,我们强调指出学科的发展是与技术方法的创新与改良密不可分的,只有有了更精细的技术方法才能揭示出事物的本质变化的规律、事件之间的相互联系。因此技术方法与学科发展是一对孪生兄弟,是比翼双飞的鸟儿,缺一不能共存、缺一不能远翔。上述所列的一些新进展也是和新技术方法出现分不开的。

  为了跟上学科的发展,适应发展的需要,我们也与时俱进地推出《细胞生物学实验技术》第二版,我们对该版的定位是:适合大多数院校(普通高等学校及医药院校)研究生与本科生学习细胞生物技术方法的需要。因此,该版的特点是:以基础训练为主,同时增加最新而又不难掌握与了解的技术,也就是说我们所遵循的仍是“三基”与“五性”的原则。为此,在本版中除了保留原有大部分内容之外,根据反馈意见增加了作为生物学与医学研究最基本手段的组织学切片及基本染色技术。此外,我们也适时地补充了多种干细胞培养的培养方法、鉴定及运用,其中包括诱导多潜能干细胞和肿瘤干细胞培养、细胞自噬、端粒与端粒酶显示技术、酵母双杂交技术、昆虫杆状病毒表达系统等,这不仅反映了技术方法的时代性,更让使用者能够熟悉这些新的技术方法,以便今后能进行更深入、更高层次的探索。

  

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